AMNGENT CONSUMABLES?
在生命科學(xué)領(lǐng)域的研究中,離心是一種必不可少的技術(shù)手段,更是實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。實(shí)驗(yàn)室的小伙伴們經(jīng)常會(huì)問(wèn),各家離心管的標(biāo)記的離心單位不一樣,這該如何區(qū)分比較呢?
離心技術(shù)的原理是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮,從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離之目的。
有些生物顆??梢栽谥亓?chǎng)(1×g)作用下實(shí)現(xiàn)分離,如人血細(xì)胞,將處理過(guò)的血細(xì)胞置于桌上1-2 小時(shí),由于不同細(xì)胞的大小不一樣,白細(xì)胞和紅細(xì)胞能自動(dòng)分層。但若需分離更小的生物顆粒,需要遠(yuǎn)大于重力的力,通常我們稱(chēng)這個(gè)力為離心力,我們可以通過(guò)沿軸旋轉(zhuǎn)裝有懸浮顆粒的離心管來(lái)實(shí)現(xiàn)用離心技術(shù)分離不同顆粒。利用離心機(jī)使離心管旋轉(zhuǎn),裝載了離心管并帶動(dòng)離心管沿軸旋轉(zhuǎn)的是轉(zhuǎn)頭,顆粒在放射狀的離心力下從軸心向外運(yùn)動(dòng)。不管是細(xì)胞還是生物大分子受到離心力都可以用以下公式計(jì)算:
(1)
F離心力:顆粒受到的離心力;
m:顆粒的質(zhì)量;
ω:角速度;
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離。
通常情況下,旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)頭受到的放射狀的力都是由相對(duì)離心力(RCF:Relative centrifugation force)來(lái)衡量的。而所謂的相對(duì)離心力即是離心力與重力之比,用以下公式表示:
(2)
RCF:相對(duì)離心力;
F離心力:顆粒受到的離心力;
F重力:顆粒受到的重力;
m:顆粒的質(zhì)量;
ω:角速度;
g:重力加速度;
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離。
ω 是轉(zhuǎn)頭的角速度,指轉(zhuǎn)頭每秒鐘轉(zhuǎn)過(guò)的弧度數(shù),其值就是:
(3)ω=2πRPM/60=0.10472RPM
RPM:轉(zhuǎn)頭每分鐘轉(zhuǎn)過(guò)的轉(zhuǎn)數(shù)。
結(jié)合公式(2)和公式(3)可得到同一轉(zhuǎn)頭的轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力之間的關(guān)系:
(4)
r:離心半徑,即旋轉(zhuǎn)軸到顆粒的距離(單位:mm)。
離心管在離心機(jī)中離心的過(guò)程中,管口至管底的各點(diǎn)與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離(離心半徑)是不一樣的,在計(jì)算中采用平均半徑作為離心半徑:r=(r min+r max)/2。
由上可以看出轉(zhuǎn)頭的相對(duì)離心力與轉(zhuǎn)頭的轉(zhuǎn)速的平方成正比,而且與轉(zhuǎn)頭的半徑成正比。對(duì)于同一轉(zhuǎn)頭而言,由于半徑不變,增加轉(zhuǎn)速也就相當(dāng)于提高了相對(duì)離心力。
以安進(jìn)特的離心管為例,安進(jìn)特15ml離心管的離心力是9400G,當(dāng)離心半徑為8cm即80mm時(shí),代入公式(4),
RPM2=(9400x10002)/(1.12x80)
開(kāi)方后得出轉(zhuǎn)速約為10000rpm。同理,已知轉(zhuǎn)速為15000rpm,離心半徑為8cm時(shí),代入公式(4)
RCF=1.12x80x(15000/1000)2
我們可以計(jì)算得出相對(duì)離心力約為20000g。
由于安進(jìn)特的內(nèi)部測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)是15ml離心管的測(cè)試值達(dá)到11000g以此來(lái)保證各種使用條件下9400g的相對(duì)離心力,而安進(jìn)特50ml離心管達(dá)到8400g使用的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)是10000g,因此使用安進(jìn)特15ml離心管做實(shí)驗(yàn)時(shí)想要滿足9400g相對(duì)離心力的需求時(shí)也可以放心大膽地使用該管哦!
圖片來(lái)源 l 安進(jìn)特
策劃制作 l 呂莊周